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檢驗流程

標本要求

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標本采集方法

一、  血液檢驗標本采集方法:

     血液檢驗標本分為全血、血漿和血清。全血標本主要用于臨床血液學檢查,如:血細胞計數和分類、形態學檢查等。血漿標本多用于內分泌激素測定、血栓和止血檢查。血清標本多用于臨床化學和免疫學的檢測。

按血液標本采集部位的不同,又可分為靜脈血、動脈血和毛細血管血三種。絕大多數檢查采用靜脈血,少數檢查如血氣分析、乳酸和丙酮酸測定需要用動脈血、毛細血管血主要用于各種微量檢查法和大規模普查。

靜脈血是最常用的實驗室檢查標本,真空采血法是最好的靜脈血采集技術?;驹硎菍㈦p向針的一端在持針器的幫助下刺入靜脈,有回血后將另一端插入真空試管內,血液在負壓作用下自動流入試管內。由于在完全封閉的狀態下采血,避免了血液外溢引起的污染,并有利于標本的運輸和保存。標準真空采血管采用國際通用的頭蓋和標簽顏色顯示采血管內添加劑種類和檢測用途,可根據需要選擇相應的盛血試管。

(一)靜脈血采集方法、注意事項和采集樣品時所用材料的安全處置:

1、止血帶或壓脈器:采集靜脈血時,止血帶壓迫靜脈時間不宜超過40秒為宜,否則容易引起淤血、靜脈擴張,并且影響某些指標的檢查結果,如乳酸升高、pH值降低等。

2、采血時間和部位:大多數化驗檢查要求清晨、空腹。采集靜脈血應盡量避免在輸液的同時取血,輸液不僅使血液稀釋,而且對實驗室檢查結果產生嚴重干擾,特別是血糖和電解質。

3、避免溶血、雜質污染:采血器不許無菌、干燥、潔凈,避免特別用力抽吸和推注、避免化學污染和細菌污染引起的溶血。因為紅細胞的某些成分與血清(漿)不同,樣本溶血可使紅細胞的某些成分釋放到血清(漿)中去,影響實驗室的檢查結果。

4、血樣的采集:血樣要求在每一天的同一時間采集,理想的時間是早晨7:00到8:00,尤其是監測為目的時,更要保證樣本采集時間的統一。最后一次食物和液體應在前一天下午6:00到8:00(急診檢驗例外)。血樣采集應在不服藥期間,如在早晨服藥前。血樣采集時,患者應仰臥位,采血點應在同一靜脈區,通常為肘窩靜脈。

5、標本采集后應立即送檢,放置過久影響檢驗結果。當取血不順利時,切忌在同一處反復穿刺,易導致標本溶血或有小凝塊,影響檢查結果。

6、采集血培養標本時應先注射厭氧瓶,盡量減少接觸空氣時間。

7、微量元素測定采集標本的注射器和容器不能含游離金屬。

8、采集樣品所用材料的安全處置:使用后的采血器、注射器針頭等銳器應當直接放入不能刺穿的利器盒內或毀型器內進行安全處置,禁止對使用后的一次性針頭復帽,禁止用手直接接觸使用過的針頭、刀片等銳器物;注射器針筒、棉簽等其他醫療廢物放入黃色醫療廢物袋中,醫療廢物和生活垃圾分類收集存放。消毒毀型后的醫療廢物必須交給指定的醫療廢物處理廠,不得擅自廢棄。

(二)臨床化學/免疫檢驗標本:

     臨床化學/免疫檢驗多用非抗凝血標本,最好使用真空負壓采血管。標本采集主要注意:

1、化學項目大多數需空腹采集靜脈血,多個單項化學檢測項目組合檢驗時一般可采一管血。

2、采血量視檢查項目的多少而異,通常2-5毫升。

3、多個組合檢驗項目同時采血時,應按下列順序采集:

   血培養     無添加劑管    凝血管    有添加劑管

   有添加劑管的順序為:

   枸櫞酸鹽管     肝素管    EDTA管    草酸鹽管/氟化鈉管

 4、不論是抗凝血還是非抗凝血,為了縮短血清或血漿與血細胞的接觸時間,血液標本收集后,須盡可能早地將血清或血漿分離出來,避免影響檢驗結果準確性。從血液標本采集開始,必須在2小時內將全血處理為血清或血漿。

(1)血清(非抗凝血):采血后標本于22~25℃(室溫)15~30分鐘后可自行完全凝固,禁用木棍和玻棍等剝離凝塊;冷藏標本凝集較慢,加促凝劑者凝集加快。

(2)血漿(抗凝血):應采用抗凝管采血,采血后標立即顛倒混合5~10次,采血后數分鐘內可離心分離血漿。

(3)冷藏標本:通過抑制細胞代謝來穩定標本中溫度依賴性的成分。標本于2~8℃冷藏。需要冷藏的標本有:兒茶酚胺、胃泌素、甲旁素、pH/血氣、血氨、乳酸、丙酮酸等,全血標本一般不冷藏,血鉀標本冷藏不得超過2小時,全血標本切忌冷凍。

(4)代謝抑制物和防腐劑的應用:用于抑制細胞代謝。血標本中加入氟化鈉后,血細胞未分離情況下血標本中:血糖,22~25℃穩定24小時,2~8℃穩定48小時;氟化鈉不適用于新生兒及兒童的血糖測定(因兒童紅細胞壓縮體積[pcv]高,細胞糖酵解難以控制);氟化鈉-麝香草酚混合劑不適用于酶學檢測(因其抑制酶的活性);甲醛草酸鉀抗凝保存劑也不適用于血糖測定。

(三)紅細胞沉降率(血沉,ESR)檢測標本:

靜脈采集枸櫞酸鈉(109mmol/L,即32.06 g/l)抗凝血(枸櫞酸鈉抗凝管采血,黑色蓋帽的管子)。

采血注意事項:

1、單獨采一管血: 管內已有0.4毫升的抗凝劑,采血正好到2毫升的刻度處(抗凝劑:全血=1:4)。

2、采血后立即倒置混勻5~10次。

3、采血后立即送檢。

(四)血常規(全血細胞分析)檢驗標本:

    一般用 EDTA 1.5~2.2mg /ml抗凝(EDTA抗凝采血管,紫色蓋帽的管子)。

采血注意事項:

1、采血后立即倒置混勻5~10次,不可用力震蕩。

2、應按抗凝管刻度采血至2毫升,可不用空腹。

3、采血后立即送檢(需顯微鏡觀察學細胞形態的標本采血后應及時推片固定,因為超過2小時學細胞的形態會發生改變)。

4、血型和血常規可只采一管血。

(五)75克葡萄糖耐量試驗(OGTT)/ 胰島素釋放試驗 / C肽釋放試驗:

1、病人準備:檢查前三天每天碳水化合物量一般不低于250-300克。影響試驗的藥物(如:咖啡因、口服避孕藥、水楊酸鹽等)應停用三天,實驗前一天晚餐后不再進食,空腹過夜(8-14小時)。

2、標本采集:

(1)次日晨空腹抽取血液2毫升,抗凝,測定血漿葡萄(即:空腹血糖,FPG)。

 (2)將75克無水葡萄糖溶于200-300毫升水中,5分鐘內飲完。

 (4)口服葡萄糖后,準確于30分鐘、1小時、2小時、3小時各抽取血液,算上空腹的,共5管血,分別測定葡萄糖。其中2小時葡萄糖水平是關鍵。

3、標本保存:采血后1小時內分離血清并及時放2~8℃冷藏保存。

4、注意事項:胰島素測定受溶血影響較大,應避免溶血。

(六)高血壓系列檢驗標本:

1、高血壓三項:(腎素、血管緊張素I、II):

(1)病人準備:β-阻斷劑、血管擴張劑、利尿劑及甾體激素、甘草等影響體內腎素水平,一般要在停藥后2周測定腎素活性(PRA),利血平等代謝慢的藥物應在停藥3周測定。不宜停藥的病人改服胍乙啶等影響PRA較小的降壓藥。鈉攝入量影響機體PRA水平,故病人測定前3天應適量減少食鹽攝入量,最好同時測定取血前24小時尿鈉含量,以供分析PRA結果時參考。

(2)標本采集:靜脈取血4~5毫升,拔除針頭后緩慢注入到專用抗凝管中,蓋好管塞后上下顛倒5次,混勻后2500轉/分離心5~10分鐘、分離血漿,將血漿裝入專用血漿管后低溫送檢。如不能立即送檢,需盡快冰凍保存(-15℃以下)。溶血標本不能檢測。

(3)標本類型、標本量:專用抗凝管采血,分離血漿,取2毫升血

漿送檢。

(4)標本保存:低溫冰箱保存(-15℃以下),可保存2個月。

(5)注意事項:申請單上應注明抽血時的體位(臥位:病人在早上

6~8時起床前,取靜脈血。立位:病人起床后活動3小時,取靜脈血。)和飲食情況(普食飲食、低鈉飲食);標本未及時分離血漿、反復凍融、溶血、保存不當、使用過期抗凝管等均可使結果受到影響。

2、醛固酮:

(1)病人準備:留樣前應停服利尿劑至少3周,停服抗高血壓藥物1周。

(2)標本采集:血漿醛固酮測定應采用肝素抗凝,采集后立即分離血漿,置-20℃保存待測;尿液標本要準確記錄24小時尿量。

用10~15毫升濃鹽酸防腐。

(3)申請單上注明:抽血時的體位(臥位、立位)和飲食情況(普食飲食、低鈉飲食);尿液標本要準確記錄24小時尿量。

(七)皮質醇標本采集及注意事項:

       正常人皮質醇的分泌存在晝夜節律,一般為早上8點或下午點采血,送檢時務必在申請單上注明采血時間。

(八)流式細胞術檢測項目的標本采集及注意事項:

1、淋巴細胞亞群系列:

標本要求:EDTA或肝素抗凝全血2毫升(推薦EDTA)。

注意事項:該系列項目在不同年齡段的細胞參考值不盡相同,所以送檢時請務必在申請單上注明病人年齡。

2、白細胞免疫分型:

標本要求:肝素抗凝骨髓或全血2毫升。

注意事項:請使用白血病免疫分型專用申請單。

3、人類白細胞抗原B27檢測(HLA-B27)/陣發性睡眠性血紅蛋白尿癥(PNH)檢測:

標本要求:EDTA或肝素抗凝全血2毫升

注意事項:保證新鮮標本,流式細胞術檢測項目需要24小時內送檢。

(九)微量元素檢測標本采集要求:

1、采血人員應戴乳膠或聚乙烯手套,若手套涂粉,需用靜脈采血皮膚清潔法處理手套后進行操作。

2、橡皮塞對鋅有污染,故普通采血管不可使用,請使用本中心提供的專用管。

3、采集方法:采靜脈血0.5~1.0毫升,采集后馬上輕輕顛倒混勻,粘上條形碼,裝入自封袋送檢。

4、如不能及時送檢,應放置2~8℃冷藏保存。

5、標本凝固或含凝塊,不能檢測。

(十)遺傳學檢測標本采集要求:

(1)標本采集:外周血標本可使用中心配送的肝素抗凝管(遺傳專用)和采血針進行采集,采集后立即將試管輕輕顛倒混勻,以免凝血;臍帶血標本、骨髓標本可以在穿刺成功后,打開中心配送的肝素抗凝管蓋,將臍帶血或骨髓注入采集管中,立即

將試管輕輕顛倒混勻,以免凝血,請注意無菌操作,不要污染管蓋。請避免使用注射器采集標本后直接注入采集管的方式進行標本采集,以免引起溶血;請勿使用EDTA等抗凝管采集標本。

(2)標本量:外周血,臍帶血、骨髓各4毫升。

(3)標本送檢:合格標本須于采血后當天送至遺傳實驗室,故請于

標本采集后及時通知我中心工作人員接收標本;標本有溶血、凝血現象,也視為不合格標本。骨髓標本更應盡快送到實驗室。

(4)標本保存:標本采集后置于18~25℃保存,不可冷凍,不可放置于高溫環境中

(5)申請單填寫:請完整填寫申請單,尤其是標本采集時間、性別、

病史、臨床診斷等。

(十一)基因檢測標本采集要求:

1、所有用于基因檢測的標本必須用無菌試管或容器留取,嚴禁使用肝素抗凝管,采集標本時注意無菌操作。

2、為避免污染,送檢基因診斷標本項目需要單人、單項目、單管。

3、采集方法:

(1)血液標本:抽取病人靜脈血,置無菌試管中,室溫自然凝固或2000轉/分離心,取分離出的EDTA抗凝血漿/血清送檢。

(2)女性分泌物標本:

①分泌物標本采樣應在非月經期進行;采樣前3天內不使用陰道內藥物,不沖洗陰道;24小時內不應有性行為。

②采集時先用棉簽將宮頸口或尿道口過多的分泌物輕輕擦去,更換棉拭子,將棉拭子伸入宮頸,通過上皮交界處,旋轉3~5周,以保證取得較多的柱狀上皮標本,對于懷疑HPV感染的患者,盡量采集病變部位標本,可提高HPV的檢出率。將取樣后的棉拭子放入配套的軟管中,旋緊管蓋。

(3)男性分泌物標本:

先清潔尿道口,將棉拭子伸入男性尿道1厘米,旋轉3~5次獲得標本,將取樣后的棉拭子放入配套的軟管中,旋緊管蓋。

(4)疣體標本:

對于生殖器或肛周有疣狀體增生,懷疑為尖銳濕疣者,宜直接采集疣體組織置于標本管中送檢。

備注:疣體標本時,需要在申請單上的標本類型欄內寫明“疣體”。

4、標本保存:檢測靶核酸為DNA的標本,可在2~8℃保存3天;檢測檢測靶核酸為RNA的標本,應在-20℃以下保存。

(十二)骨髓檢查的要求和注意事項:

1、涂片要求:二張血片,六張骨髓片,懷疑白血病則需8張骨髓片。骨髓血片注明“B”,骨髓片注明“M”以示區別。

2、申請單注意事項:

(1)病歷摘要:應填寫全面,尤其是肝、脾、淋巴結、出血狀況等與血液病相關的癥狀以及藥物的應用等,均應填寫清楚。

(2)化驗結果:血常規結果一定不能缺,如可能,MCV、MCH、MCHC及分類也要填上。

(3)采取骨髓的部位也要填上。如采取骨髓不順利,應重抽,以免耽誤病人診斷。

(4)寫上主治醫生聯系方式,如科室電話、手機號碼等(以方便隨時以臨床取得聯系)。

二、尿液常規檢驗標本采集方法:

(一)尿標本種類:

按檢驗目的,??刹捎孟铝袠吮荆?/P>

1、晨尿:最好。安靜狀態下留取清晨第一次尿,該標本為濃縮尿,其細胞和管型等形態完整,適合做各種有形成分的檢查和尿蛋白、尿糖等項目的測定。

2、隨機尿:較常用,適用于門診和急診的病人常規檢驗,但結果易受多種原因影響。

3、空腹或餐后尿:適用于糖尿病、尿膽原、尿蛋白等的檢查。

4、24小時尿:用于尿液成分定量分析。

(1)24小時尿采集方法:留尿當日早晨8點,將膀胱中的尿液排空,棄去不要。之后的每次排尿均收集于一干凈的大容器內。至次日早晨8點最后一次尿液共24小時之間的所有尿液全部收集于大容器內。在收集期內,每次尿液標本均應放冰箱2~8℃或陰涼處保存。全部收集完畢測量并記錄24小時總尿量,混勻后取20~30毫升置于有蓋容器內送檢。

(2)24小時尿可用于Cr、BUN、K、Na、Cl、Ca、P、UPR、UAER等的檢測。

5、特殊實驗尿(如3小時、8小時、12小時等計時尿和餐后尿等):則應按醫囑要求進行留尿,并注明用藥時間,便于分析比對。

6、清潔尿(中段尿、導管尿、膀胱穿刺尿):用于病原微生物培養、鑒定和藥敏試驗。

(二)尿液標本收集容器要求:

1、清潔、干燥、有蓋、便于標記和轉送、一次性使用,有較大開口便于收集。

2、避免陰道分泌物、精液、糞便等污染,還應注意避免煙灰、紙屑等異物混入。

3、無干擾化學物質(如表面活性劑、消毒劑)混入,不可使用未經洗滌的裝藥物或試劑的器皿收集標本。

4、能收集足夠尿液,最好大于50毫升,如收集定量尿,容器應足夠大,并加蓋,必要時加防腐劑。

5、如需培養應在無菌條件下,用無菌容器收集中段尿。

(三)尿液采集方法及注意事項:

     尿液常規檢查標本應按照下列原則進行采集:

1、尿液標本必須新鮮,并要及時檢查,否則生長細菌,使其中的化學成分發生變化。清晨第一次尿最理想,因其較濃縮、條件恒定,便于對比。門、急診患者也可隨機取尿。在留取24小時尿或2小時尿時,尿液標本應該在冰箱保存,也可根據檢測目的選擇性加入防腐劑。

2、尿液采集方法多采用自然排尿法,需要注意異物污染。對自然排尿困難或需細菌培養者,可在無菌操作下用導尿法或膀胱穿刺法采集。

3、尿中某些化學物質及有形成分不穩定,一經排出后易發生物理、化學變化;而尿中原有或污染的細菌生長也可導致成分改變,如葡萄糖分解。因此,采集的尿應加蓋后盡快送檢,在采集2小時內完成有關檢查。

4、如不能及時送檢,或收集較長時段尿樣,可采取化學防腐(不能用于微生物檢查)、冷藏等保存措施;尿液標本在冰箱可保存6~8小時,但細菌等有形成分會有破壞,并會有結晶析出。

5、根據不同檢測目的選擇不同防腐劑,臨床使用較多的防腐劑有:

(1)甲醛(formalin),用于尿液有形成分檢查,濃度為400mg/L尿液,既40%。

(2)甲苯(toluene),常用于尿糖和尿蛋白等化學成分的定性和定量檢查,濃度為5~20毫升/L尿液。

(3)濃鹽酸(hydrochloric acid):常用于定量測定尿醛固酮、兒茶酚胺等,濃度為1毫升/L尿液。

6、尿沉渣檢查:清晨空腹第一次尿,應在1小時內送檢。標本置于干燥、干凈的容器內,至少10毫升。一般情況下,有患者自己采集中段尿。女性患者應清洗外陰部后留尿。

7、特殊試驗外,晨尿和隨機尿都要中段尿,女性在經期不做尿液檢查。

 

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